耐多药结核病给全球结核病控制带来了严峻的挑战, 早期快速的诊断是合理治疗的基础, 也是耐药结核病防治的关键。如果耐多药结核病不能得到及时、准确的诊疗, 最终会导致继发性耐药的产生和结核病死亡率的增加。
随着分子生物学技术的突飞猛进, 耐药结核病相关耐药基因快速诊断技术的使用日益广泛。Xpert MTB/RIF系统就是一种全新的快速诊断结核病和检测MTB耐药性的系统, 该系统针对MTB的81 bp利福平耐药核心区间(RRDR)设定引物、探针并进行扩增检测, 根据其是否发生基因突变来检测样本中是否含有MTB及其是否对利福平耐药, 可以全自动地对样本进行核酸提取、纯化及浓缩, 在2 h内出结果, 为全自动一体化半定量巢式实时聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)系统。
Xpert MTB/RIF为结核病的早期诊断和治疗提供了可能, 可以缩短患者接受化疗的时间, 具有良好的临床应用价值。
2010年12月,WHO将这种被结核病防控专家称为近百年来在结核病诊断领域具有“里程碑”意义的分子检测技术,首次向国际社会推荐,受到广泛关注,取得良好的预期效果。
Xpert MTB/RIF检测主要拥有五大优势:
1. 检测速度快
缩短患者启动治疗时间。Xpert MTB/RIF检测可在2个小时内诊断结核分枝杆菌复合群(MTB 复合群),以及对利福平耐药情况。韩国N.Kwak等研究发现使用Xpert MTB/RIF可将患者启动治疗的时间缩短66.7%(21天缩短为7天)。
2.准确性高
研究结果显示,在缓冲液或非感染性痰液中,该系统检测下限可达到每个反应5 个拷贝纯化MTB基因组或每毫升痰液131菌落形成单位(Colony FormingUnits, cfu) 的MTB,与自动化液体培养检测的敏感度10~100 cfu/mL相似,比痰涂片镜检敏感度10 000个cfu/mL 高2 个数量级,因而可明显提高结核菌的检出率。Xpert MTB/RIF系统检测MTB分为高、中、低、极低和未检出5个量级。
3.操作简便
由于Xpert MTB/RIF系统将样本制备、核酸提取、扩增及检测整合在一个卡匣内,自动化程度高,整个过程在封闭的试剂盒中完成,其生物安全性高,可在低风险结核病实验室开展,非常适用于基层。
4.快速检测利福平耐药
据WHO报道,80%以上利福平耐药的结核病患者同时耐异烟肼,即绝大多数利福平耐药患者为耐多药结核病患者。故此技术可尽早发现耐多药(MDR-TB)结核病患者,促进结核病传播的高效管理,降低结核病的发病率,为解除隔离决策提供依据。
5.可对多种标本进行检测
不仅可以检测痰标本,还可以检测脓液、抽吸物、支气管肺泡灌洗液,活检组织、浆膜腔积液、胃液、甚至粪便及尿液等。因为其准确且快速,敏感性高及特异性强,因而临床广泛用于疑似结核、耐多药肺结核、肺外结核、儿童结核、HIV/TB等患者的诊断检测。
目前,Xpert MTB/RIF技术是WHO推荐的用于结核分枝杆菌及利福平耐药快速检测产品。WHO也将这一技术扩展到儿童结核病的诊断。国家结核病分级诊疗综合防治服务模式实施方案中也明确提出县级结防机构应常规开展Xpert MTB/RIF诊断技术,作为发现结核和耐多药结核病人重要手段,届时将会有更多的结核病患者从中受益。